一种基于黑曲霉的耐热广谱pH型重组多糖裂解单加氧酶rLPMO9制剂的生产方法及其应用
河南省科学院生物研究所有限责任公司 河南省科学院
2025-11-18
黑曲霉 重组多糖裂解单加氧酶rLPMO9制剂 耐热广谱pH型
一种基于黑曲霉的耐热广谱pH型重组多糖裂解单加氧酶rLPMO9制剂的生产方法及其应用,可有效解决耐热广谱pH型重组多糖裂解单加氧酶rLPMO9制剂的生产,实现在降解木质纤维素材料中的应用.氨基酸序列由黑曲霉HKS11菌株的LPMO9基因编码,由412个氨基酸残基组成,其催化活性中心由His21、His103、Tyr183和Cu2+构成,通过将编码所述酶的基因克隆至表达载体pPIC9K的EcoRI和NotI酶切位点之间,使目的基因序列与表达载体pPIC9K相连接,得到表达重组质粒pPIC9K‑LPMO9;经PmeI线性化处理后,通过电穿孔法转化至毕赤酵母GS115宿主细胞,获得重组酵母工程菌株,发酵、离心即得.方法简单易操作,降低酶解成本,为木质纤维素的高效节能转化提供了技术支持.
