生产胆固醇的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用
河南省纳普生物技术有限公司 河南省科学院
2025-06-06
酿酒酵母工程菌 胆固醇 构建 应用 生产 位点 基因 酿酒酵母 固醇 还原酶 启动子 生物工程技术领域 大小调节 基因工程 内源基因 优化合成 关键酶 内质网 前体物 野生型 敲除 摇瓶 酵母 发酵 替换 弱化
本发明属于基因工程和生物工程技术领域,具体涉及一种生产胆固醇的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用。该酿酒酵母工程菌将野生型酿酒酵母的ERG6基因的启动子替换为启动子ERG7p、将基因GgDHCR24及StDWF5插入X‑3位点、将基因tHMG1和IDI1插入X‑4位点、将基因ERG20和ERG9插入XII‑4位点、将基因INO2插入XII‑5位点。本发明通过在酿酒酵母中敲除或弱化酵母内源基因、优化合成胆固醇的关键酶固醇C‑24还原酶和固醇C‑7还原酶、提高前体物供应和过表达内质网大小调节因子INO2的策略提高胆固醇的产量,实现了在摇瓶中发酵72 h获得60.63 mg/L胆固醇的效果。