一种链霉菌双启动子诱导型穿梭载体的构建方法及应用
河南省商业科学研究所有限责任公司 河南省科学院
2023-03-03
链霉菌 基因工程 理论研究基础 组成型 信号肽 蛋白过 理论基础
本发明属于基因工程技术领域,涉及一种链霉菌双启动子诱导型穿梭载体的构建方法及应用,其目的在于为蛋白生产提供理论研究基础,涉及构建方法包括在质粒pSET152中插入Kpn I和Spe I限制性酶切位点,插入组成型强启动子ermE*及诱导型启动子tipA,并引入了Bsa I限制性位点,制备得到双启动子诱导型穿梭载体pSETTK;涉及应用方法是添加信号肽融合目的基因的片段至穿梭载体pSETTK,形成表达质粒;以链霉菌为宿主,最终实现对目的蛋白的诱导表达;本发明优势在于构建的穿梭载体pSETTK具有双启动子,组成型启动子ermE*本身可使得目的蛋白过表达,再加上诱导型启动子tipA的调控作用,为标准化生产和可调控生产提供了理论基础.
