一种磷脂酶D的异源表达重组质粒以及其构建方法
河南省商业科学研究所有限责任公司 河南省科学院
2021-05-18
磷脂酶 重组质粒 人工合成质粒 肉桂链霉菌 信号肽 链霉菌 蛋白质 基因段 质粒结构 链霉菌宿主
本发明涉及一种磷脂酶D的异源表达重组质粒,其构建方法包括步骤一,人工合成质粒pUC57‑STR_ORI,步骤二,人工合成质粒pUC57‑STR_PLD,步骤三,重组质粒的构建,最终得到包括Kasop*组成型强启动子,肉桂链霉菌的信号肽,链霉菌来源的磷脂酶D合成基因和ApmR抗性筛选基因的重组质粒.本发明中所得重组质粒能够在链霉菌中成功表达,启动子具有强启动作用,信号肽能够使引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的效果良好,磷脂酶D合成基因段能够使得磷脂酶D成功表达.本发明中通过质粒合成方法合成基因的表达元件,进而形成完整的重组质粒,且质粒结构稳定,并且便于向链霉菌宿主内转移,并保证在链霉菌宿主内成功表达.
