一种在链霉菌中高效表达磷脂酶D的方法及重组链霉菌
河南省商业科学研究所有限责任公司 河南省科学院
2021-03-30
链霉菌 磷脂酶 重组链霉菌 基因工程领域 基因片段 宿主菌 重组蛋白异源 密码子 创新性
本发明属于基因工程领域,涉及一种在链霉菌中高效表达磷脂酶D的方法,步骤一,选择磷脂酶D的异源高效表达宿主,步骤二,筛选磷脂酶D合成基因的最佳来源,步骤三,获取链霉菌来源的磷脂酶D基因片段,步骤四,连接目的基因形成磷脂酶D重组质粒,步骤五,重组质粒接合转移至宿主菌,步骤六,重组菌株的发酵培养及磷脂酶D酶活检测,进而得到高效表达磷脂酶D的重组链霉菌.选用链霉菌来源的磷脂酶D进行重组蛋白异源表达,具有天然优势,对磷脂酶D合成基因进行了密码子优化,选取变铅青链霉菌SBT5作为异源表达宿主,优异的异源表达效果加上良好的胞外活性分泌表达效果,使得该重组菌株具有极高的创新性和实用性.
