山茱萸籽血管紧张素转化酶抑制肽的分离纯化、鉴定及活性分析
河南省商业科学研究所有限责任公司 河南省科学院
2026-04-13
山茱萸籽 血管紧张素转化酶抑制肽 分离纯化 液相色谱-串联质谱 结构鉴定
为提高山茱萸的综合利用率，从山茱萸籽中筛选具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制能力的多肽，并通过单因素实验与响应面法优化其制备工艺，采用超滤、凝胶过滤色谱及高效液相色谱(HPLC)对酶解物逐级分离纯化。运用液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS)对得到的最优肽组分进行肽段序列鉴定和生物学活性预测。结果表明，山茱萸籽降压肽最佳酶解条件为使用胰蛋白酶，酶解时间190 min,酶解温度36℃,pH 8,此条件下的ACE抑制率(49.65±1.61)%,与预测值接近；经过超滤分离得到分子质量<3 ku的组分活性较好。Sephadex G-15和高效液相色谱法分离获得ACE抑制率最高的组分A2。通过LC-MS/MS对A2组分的肽序列鉴定结果进行筛选，得到25条肽段(评分>25),氨基酸序列长度主要为2～6个，分子质量均小于1 ku,将筛选得到的肽段进行活性预测，其中LMI、VAL、LSL、VNL、VIY、TLGF肽段具有ACE抑制功能，肽段中含有Phe、Ala、Val、Leu等与ACE抑制活性有关的疏水氨基酸，其中5条肽段为新的ACE抑制肽，具有稳定性，均无毒性。
